畏伱狠 3星
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1、在装柱过程中,要防止柱床中出现断裂或气泡现象,要使界面保持平整 。
2、柱子填装紧与否对分离效果很有影响,若松紧不均,特别是有断层时,影响流速和色带的均匀,但如果装时过分敲击,色谱柱填装过紧,又使流速太慢。
3、影响层柱子整体渗透速度分布不均,致使色素带不是整齐的环状色素带,进而增长分离各色素的时间,应在装填层析柱前用适量的丙酮润洗一下,后再装入氧化铝时应边加边敲打层析柱使氧化铝殷实,最后用真空抽滤方法,用乙醚进行抽滤至无气泡为止。
4、柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到最佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使最好的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这就是管壁效应。
9小时前
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