绘制标准曲线的一般步骤

标准曲线的作法

(1)标准液浓度的选择：在制备标准曲线时,标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能变异最低与最高值,一般可选择5种浓度.浓度差距最好是成倍增加或等级增加,并应与被测液同样条件下显色测定.

(2)标准液的测定：在比色时,读取光密度至少读2-3次,求其平均值,以减少仪器不稳定而产生的误差.

(3)标准曲线图的绘制：一般常用的是光密度一浓度标准曲线.

①用普通方格纸作图.图纸最好是正方形(长：宽=l：1)或长方形(长：宽=3 ：2),以横轴为浓度,纵轴为光密度,一般浓度的全距占用了多少格,光密度的全距也应占用相同的格数.

在适当范围内配制各种不同浓度的标准液,求其光密度,绘制标准曲线,以浓度位置向上延长,光密度位置向右延长、交点即为此座标标点.然后,将各座标点和原点联成一条线,若符合Lambert-Beer氏定律,则系通过原点的直线.

②若各点不在一直线,则可通过原点,尽可能使直线通过更多点,使不在直线上的点尽量均匀地分布在直线的两边.

③标准曲线绘制完毕以后,应在座标纸上注明实验项目的名称,所使用比色计的型号和仪器编号、滤光片号码或单色光波长以及绘制的日期、室温.

④绘制标准曲线：一般应作二次或三次以上的平行测定,重复性良好曲线方可应用.

⑤绘制好的标准曲线只能供以后在相同条件下操作测定相同物质时使用.当更换仪器、移动仪器位置、调换试剂及室温有明显改变时,标准曲线需重新绘制.

⑥标准曲线横坐标的标度：从标准液的含量换算成待测液的浓度.